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[1]徐瑶瑶,朱文武,李 洁,等.抗膀胱肿瘤抗原单克隆抗体纯化方法的比较[J].武汉工程大学学报,2023,45(01):76-80.[doi:10.19843/j.cnki.CN42-1779/TQ.202203008]
　XU Yaoyao,ZHU Wenwu,LI Jie,et al.Comparison of Methods for Purification of Monoclonal AntibodiesAgainst Bladder Tumor Antigens[J].Journal of Wuhan Institute of Technology,2023,45(01):76-80.[doi:10.19843/j.cnki.CN42-1779/TQ.202203008]
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抗膀胱肿瘤抗原单克隆抗体纯化方法的比较(/HTML)
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《武汉工程大学学报》[ISSN:1674-2869/CN:42-1779/TQ]

卷:
45
期数:
2023年01期
页码:
76-80
栏目:
出版日期:
2023-02-28

文章信息/Info

Title:
Comparison of Methods for Purification of Monoclonal Antibodies
Against Bladder Tumor Antigens
文章编号:
1674 - 2869（2023）01 - 0076 - 05
作者:
徐瑶瑶1; 朱文武1; 李 洁 2; 李 净2; 王荣鹤1; 朱雄伟*1
1. 武汉工程大学环境生态与生物工程学院，湖北 武汉 430205；
2. 武汉雁达生物技术有限公司，湖北 武汉 430200
Author(s):
XU Yaoyao1; ZHU Wenwu1; LI Jie2; LI Jing2; WANG Ronghe1; ZHU Xiongwei*1
1. School of Environmental Ecology and Bioengineering，Wuhan Institute of Technology，Wuhan 430205，China；
2. Wuhan Yanda Biotechnology Co.， Ltd， Wuhan 430200， China
关键词:
膀胱肿瘤; 抗体; 离子交换层析法; 亲和层析
Keywords:
bladder tumor;  antibody;  ion exchange chromatography;  affinity chromatography
分类号:
Q939.91
DOI:
10.19843/j.cnki.CN42-1779/TQ.202203008
文献标志码:
A
摘要:
利用单克隆抗体制备，细胞融合及选择培养基筛选等技术制备抗膀胱肿瘤抗原单克隆抗体（BTA）。通过G蛋白亲和层析法（G柱法）和Q-琼脂糖亲和介质离子交换层析法（蓝胶加Q柱层析法）分别提取抗体，以SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外分光光度计、酶联免疫吸附试验双抗体夹心法对两种不同方法提取的抗BTA抗体进行分析，发现G柱法得到的抗体含量明显高于蓝胶加Q柱法（P<0.05），抗体质量浓度达到60 ng/mL，G柱法提取的抗体与BTA的亲和力大于其他方法，且蓝胶加Q柱层析法生产样品活性为市售基准的97.11%（质量分数），G柱生产样品活性为101.55%（质量分数），这两种方法在抗BTA单克隆抗体纯化方面均可满足要求，可根据实际工艺状况及质控要求进行选择。

Abstract:
The monoclonal antibodies against bladder tumor antigen were prepared using techniques such as monoclonal antibody preparation， cell fusion， and selective media screening. The monoclonal antibodies were extracted by G protein affinity chromatography（G-column chromatography） and Q-agarose affinity medium ion exchange chromatography （blue gum plus Q-column chromatography），respectively.The antibodies extracted by the two different methods were analyzed by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gelelectrophoresis electrophoresis， ultraviolet spectroscopy， and dual antibody sandwich enzyme-linked immunesorbent assay method. It was found that the antibody content obtained by the G-column method is significantly higher than that by the blue gum plus Q-column method （P<0.05）， and after the antibody concentration reaches 60 ng/mL， the affinity between the antibody and the monoclonal antibodies against bladder tumor antigen extracted by the G-column method is greater than that by other methods. The sample activity produced by the blue gum plus Q-column chromatography method is 97.11% of the commercially available benchmark， while the G-column production sample activity is 101.55%. These two methods can meet the requirements in the purification of monoclonal antibodies against bladder tumor antigen， and can be selected according to the actual process conditions and quality control requirements.

参考文献/References:

［1］ 凌生涛， 姚启盛， 杨二江，等. 膀胱肿瘤抗原、尿脱落细胞学、泌尿系CT联合检查在上尿路上皮肿瘤诊断中的价值［J］. 临床外科杂志，2020，28（11）：1063-1065.

［2］ 陈泓光. 结核斑点试验联合结核抗体IgG检测对结核病的诊断价值［J］. 临床医学，2021，41（2）：40-41.
［3］ 牟江宁， 马永宏， 高敬峰，等. EC、FISH及BTA在膀胱癌鉴别诊断中的价值及相互关系［J］. 宁夏医学杂志，2022，44（1）：66-68，97.
［4］ MINA M J， PETO T E， MARTA G， et al. Clarifying the evidence on SARS-CoV-2 antigen rapid tests in public health responses to COVID-19［J］. The Lancet， 2021，397（10283）：1425-1427.
［5］ SMALL E J， ROACH M. Prostate-specific antigen in prostate cancer： a case study in the development of a tumor marker to monitor recurrence and assess response［J］. Seminars in Oncology， 2002，29（3）：264-273.
［6］ 马莉， 刘双. 单克隆抗体纯化方法比较论述［J］. 中国畜牧兽医文摘，2018，34（1）：75.
［7］ 唐雪梅， 魏琪， 陈璐，等. SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析五种种子类中药炒制前后蛋白质成分的变化［J］. 成都中医药大学学报，2021，44（1）：66-70.
［8］ 徐梦蔚， 宋武琦， 付治美，等. 实验室水平单克隆抗体制备方法及相应纯化策略的研究进展［J］. 中国生物制品学杂志，2022，35（2）：228-232，238.
［9］ RAFFERTY B， RIGSBY P，ROSE M， et al. Reference reagents for prostate-specific antigen （PSA）： establishment of the first international standards for free PSA and PSA（90：10）［J］. Clinical Chemistry， 2000，46（9）：1310-1317.
［10］ 刘春华. 一种医用核酸检测仪的电快速瞬变脉冲群抗扰度研究［J］. 电子世界，2021（9）：202-203.
［11］ HéBERT E M， RAYA R R， de GIORI G S. Use of SDS-PAGE of cell-wall proteins for rapid differentiation of Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis and Lactobacillus helveticus［J］. Biotechnology Letters， 2000，22（12）：1003-1006.
［12］ 肖增鸿， 黄昭亮， 林月霞，等. 腹水型单克隆抗体纯化方法的研究［J］. 中国医药生物技术，2013，8（6）：425-428.
［13］ 吕浩. 亲和层析在蛋白质纯化中的应用［J］. 化工管理，2015（14）：139.
［14］ LI Y S， ZHOU Y， MENG X Y， et al. Enzyme-antibody dual labeled gold nanoparticles probe for ultrasensitive detection of κ-casein in bovine milk samples［J］. Biosensors and Bioelectronics， 2014，61：241-244.
［15］ LEWIS J G， REHM B H A. ZZ polyester beads： an efficient and simple method for purifying IgG from mouse hybridoma supernatants［J］. Journal of Immunological Methods， 2009，346（1）：71-74.

相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2022-03-07
基金项目：2021年湖北省大学生创新创业训练项目
作者简介：徐瑶瑶，本科生。E-mail：[email protected]
*通讯作者：朱雄伟，硕士，讲师。E-mail：[email protected]
引文格式：徐瑶瑶，朱文武，李洁，等. 抗膀胱肿瘤抗原单克隆抗体纯化方法的比较［J］. 武汉工程大学学报，2023，45（1）：76-80.

更新日期/Last Update: 2023-03-14